ФРАКЦІОНУВАННЯ ПЛАЗМИ КРОВІ: КЛАСИЧНІ ТА ХРОМАТОГРАФІЧНІ МЕТОДИ ОТРИМАННЯ ФАКТОРА VIII ЗГОРТАННЯ КРОВІ

Анотація

Процес згортання крові являє собою послідовність хімічних реакцій за участю білків плазми, фосфоліпідів та іонів кальцію. Відсутність будь-якого з цих факторів приводить до виникнення кровотеч. Фактор VIII (FVIII) є одним із факторів згортання крові, а його дефіцит викликає розвиток спадкового захворювання, відомого як гемофілія А. Сучасне лікування гемофілії А полягає у застосуванні препаратів фактора плазмового або рекомбінантного походження. Метa роботи – розробити технологічну схему отримання препарату FVIII згортання крові в поєднанні класичних методів фракціонування плазми та хроматографії. Фракціонування плазми крові на сьогоднішній день є найбільшим сегментом промислового виготовлення терапевтичних білків. Це зумовило появу нового покоління препаратів, особливо факторів згортання крові. У статті описано результати очищення FVIII в поєднанні методів преципітації білків (з барій цитратом, ПЕГ-4000 та гідроксидом алюмінію) і двох хроматографічних етапів: іонообмінної на DEAE-SEPHAROSE й афінної на Діасорб-амінопропіловій матриці з тріазиновим барвником Procion Blue HB у ролі ліганда. Ми показали, що поєднання попереднього фракціонування плазми крові з хроматографічними методами дає змогу досягнути високого рівня очищення (приблизно в 1000 разів, від 0,017±0,004 МО/мг білка до 20,050±0,047 МО/мг білка).