ВИКОРИСТАННЯ ФЛАВОЦИТОХРОМУ b2, ІММОБІЛІЗОВАНОГО НА МАГНІТНИХ МІКРОЧАСТИНКАХ, У БАГАТОКРАТНОМУ ЕНЗИМАТИЧНОМУ АНАЛІЗІ L-ЛАКТАТУ

Анотація

Розробка селективних, чутливих і водночас недорогих методів аналізу важливих з практичної точки зору аналітів – біомаркерів найбільш поширених захворювань та індикаторів якості фармацевтичних препаратів і харчових продуктів є актуальною проблемою сьогодення. Серед таких біомаркерів важлива роль належить L-лактату – універсальному метаболіту більшості живих рганізмів. Раніше нами було розроблено високоселективний та недорогий ензиматично-фотометричний метод визначення L-лактату на основі L-лактат : цитохром с-оксидоредуктази (КФ 1.1.2.3; флавоцитохрому b2; ФЦ b2) з формуванням кольорового продукту – розчинної форми Берлінської блакиті за наявності специфічного розчинника. Перевагами запропонованого методу/ набору є абсолютна селективність, простота процедури аналізу та низька ціна порівняно з аналогічними комерційними наборами. Метою цієї роботи було дослідити можливість повторного використання флавоцитохрому b2, іммобілізованого на магнітних мікрочастинках, для ензиматичного визначення вмісту L-лактату, не знижуючи точності визначення. Доведено, що біофункціоналізовані ферментом магнітні мікрочастинки можуть бути використані для проведення багаторазового (принаймні шестиразового) ензиматичного аналізу L-лактату.

Ключові слова: магнітні мікрочастинки, флавоцитохром b2, L-лактат, ензиматичний набір.