РОЛЬ РІАНОДИНЧУТЛИВИХ Са2+-КАНАЛІВ У РЕГУЛЯЦІЇ ДИХАННЯ МІТОХОНДРІЙ ПЕЧІНКИ ЩУРІВ

Анотація

Досліджено роль mRyRs у регуляції мітохондріального дихання гепатоцитів щурів за різної позамітохондріальної концентрації Ca²⁺ та окиснення сукцинату, пірувату і α-кетоглутарату. Ізольовані мітохондрії отримували методом диференційного центрифугування. Інтактність отриманих мітохондрій визначали методом електронної мікроскопії. АТФ-азну активність суспензії мітохондрій, як показник відсутності залишків плазматичної мембрани та мембран ендоплазматичного ретикулуму, визначали на основі змін вмісту неорганічного фосфату в середовищі після інкубації мітохондрій з еозином Y, оубаїном і тапсигаргіном. Швидкість дихання реєстрували полярографічним методом з використанням електрода Кларка. Для з’ясування ролі mRyRs у регуляції мітохондріального дихання суспензію мітохондрій преінкубували з ріанодином у концентрації 0,05 мкмоль/л або вносили його у концентрації 0,1 мкмоль/л безпосередньо в полярографічну комірку. Встановлено, що після преінкубації суспензії мітохондрій з ріанодином упродовж 5 та 10 хв за окиснення сукцинату відбувається зниження споживання кисню. Унаслідок безпосереднього внесення ріанодину до мітохондрій у полярографічну комірку з концентрацією Са²⁺ в середовищі 0,1 і 1 мкмоль/л за окиснення сукцинату швидкість споживання кисню зменшилася у станах S₄, S₃ та S₄^АТФ. За окиснення пірувату преінкубація мітохондрій з ріанодином спричиняла зниження споживання кисню, як і після безпосереднього внесення ріанодину в полярографічну комірку з концентрацією Са²⁺ у середовищі 0,1 мкмоль/л. За концентрації Са²⁺ у середовищі 1 мкмоль/л зареєстроване збільшення швидкості споживання кисню під впливом ріанодину у станах S₄ та S₃ на 12,2 і 17,2 % відповідно. Споживання кисню мітохондріями за окиснення α-кетоглутарату після додавання ріанодину в полярографічну комірку з концентрацією Cа²⁺ 0,1 мкмоль/л у середовищі зростало у станах S₄ та S₃, а в середовищі з концентрацією Cа²⁺ 1 мкмоль/л – зростало у стані S₄ на 19,1 % та зменшилось у стані S₄^АТФ на 14,6 %. Аналіз даних дає змогу стверджувати, що у мітохондріях гепатоцитів mRyRs є важливою ланкою адаптативного регуляторного зв’язку між величиною мембранного потенціалу мітохондрій та інтенсивністю їхнього дихання за низьких значень позамітохондріальної концентрації Са²⁺ й окиснення пірувату. Якщо ж переважає окиснення α-кетоглутарату чи позамітохондріальна концентрація Са²⁺ є високою, то надходження Са²⁺ за участю mRyRs призводить до пригнічення процесів дихання.