ДОСЛІДЖЕННЯ ЗВ’ЯЗУВАННЯ ФАКТОРА VIII ЗСІДАННЯ КРОВІ З КРЕМНЕЗЕМНИМИ СОРБЕНТАМИ РІЗНОЇ ПОРИСТОСТІ

N. Shurko, T. Danysh

Анотація


Препарати фактора VIII зсідання крові використовуються у лікуванні пацієнтів з гемофілією А та хворобою Віллебранда. Фактор VIII отримують безпосередньо з плазми крові людини з використанням хроматографічних методів. Очищення білка методом афінної хроматографії засноване на оберненій взаємодії між білком і афінним лігандом, з’єднаним з хроматографічною матрицею. Традиційно, роль матриці в афінній хроматографії відіграють пористі матеріали, такі як агароза, поліметакрилат, поліакриламід, целюлоза та кремнезем. Під час вибору матеріалу матриці хроматографічного сорбенту необхідно враховувати кілька факторів: однорідність, гідрофільність, хімічну та механічну стабільність, селективність, високу адсорбційну ємність, розмір частинок і пор. Продемонстровано ефективність застосування барвник лігандної афінної сорбції з використанням кремнеземного носія для виділення й очищення фактора VIII зсідання крові. У статті представлено результати досліджень сорбції фактора VIII з хроматографічним сорбентом Діасорб-амінопропіл-Procion blue HB з різним розміром пор (250, 500, 750 та 1500 Å). Сорбент із розміром пор 750 Å виявився найкращим для очищення фактора VIII зсідання крові. Очищення фактора відбувалося завдяки явищу негативної афінної сорбції. Питома активність очищеного фактора зростала приблизно втричі.


Повний текст:

PDF

Посилання


Danysh T. V., Voroniak M. I., Vus M. M. Syntez ta vyvchennia vlastyvostei afinnykh sorbentiv, prydatnykh dlia vydilennia ta ochyshchennia proteinaz iz plazmy krovi // Hematolohiia i perelyvannia krovi: mizhvid. zb. 2008. Vyp. 34. T. 2. S. 83–87.

Danysh T. V., Voroniak M. I., Dultseva N. A., Shurko N. O. Syntez kremnezemnykh sorbentiv iz lihandamy – aktyvnymy barvnykamy triazynovoho riadu // Visn. Lviv. un-tu. Ser. biol. 2008. T. 47. S. 63–69.

Danysh T. V. Zastosuvannia khromatohrafichnykh sorbentiv z bioimituiuchymy lihandamy dlia oderzhannia diahnostychnykh ta terapevtychnykh bilkovykh preparativ // Hematolohiia i perelyvannia krovi: mizhvid. zb. 2008. Vyp. 34. T. 2. S. 79–83.

Dyn P., Dzhonson U., Mydl F. Afynnaia khromatohrafyia: metody. M.: Myr, 1988. 278 s.

Osterman L. A. Khromatohrafyia belkov y nukleynovykh kyslot. M.: Nauka, 1985. 536 s.

Pat. 94299 UA, C07K 1/22, 14/75. Sposib ochyshchennia faktora VIII zghortannia krovi / Shurko N.O., Danysh T.V., Novak V.L.; Zaiavl. 03.07.2009; Opubl. 26.04.2011; Biul. № 8, 2011.

Turkova Ya. Afynnaia khromatohrafyia. M.: Myr, 1980. 472 s.

Shurko N. O., Danysh T. V. Stvorennia tekhnolohii otrymannia faktora VIII zghortannia krovi z vykorystanniam metodu afinnoi khromatohrafii na kremnezemnykh nosiiakh // Biolohiia tvaryn. 2016. T. 18. № 2. S. 152–159.

Cheng E. Purification of coagulation factor VIII by liquid chromatography // J. Blood Disord Transfusion. 2016. Vol. 7. (4). P. 82.

Clonis Y. D. Dye Ligands. Affinity separation. 2000. P. 259–265.

Denizli A., Pişkin E. Dye-ligand affinity systems // J. Biochem. Biophys. Methods. 2001. Vol. 30. 49(1–3). P. 391–416.

Denizli A. Plasma fractionation: conventional and chromatographic methods for albumin purification // Hacettepe J. Biology and Chemistry. 2011. Vol. 39 (4). P. 315–341.

Pat. EP 1885486 B1. Affinity adsorbents for factor VIII and von Willebrands factor / Jason R. B., Badley S.; CA2607858A1, CA2607858C; Filed: April 09.05.2006; Publ. 23.03.2016.

Read S. M., Northcote D. H. Minimization of variation in the response to different proteins of the Commssie Blue G Dye-binding assay for proteins // Anal. Biochem. 1981. Vol. 116 (1). P. 53–64. https://doi.org/10.1016/0003-2697(81)90321-3

Rodrigues S., Verinaud C. I., Oliveira D. S. et al. Purification of coagulation factor VIII by immobilized metal affinity chromatography // Biotechnol. Appl. Biochem. 2015. Vol. 62. N 3. P. 343–348. https://doi.org/10.1002/bab.1276

Ro Sen S., Casoni Chiaroi M. Determination of factor VIII activity in plasma and concentrates: comparison between methotds // Am. Clin. Lab. 2002. P. 32–37.

Scoups K. P. Surrent protocols in protein science. 1995. 3800 p.

Sparrow R. L., Greening D. W., Simpson R. J. A protocol for the preparation of cryoprecipitate and cryodepleted plasma // Methods Mol. Biol. 2011. Vol. 728. P. 259–265. https://doi.org/10.1007/978-1-61779-068-3_17




DOI: http://dx.doi.org/10.30970/vlubs.2017.76.03

Посилання

  • Поки немає зовнішніх посилань.